Life
Редактирование гена утрофина усилило мышцы мышей с моделью дистрофии Дюшенна, но лечения для людей пока нет
Публикация:
У новорождённых мышей с моделью дистрофии Дюшенна редактирование гена утрофина с помощью MyoAAV повысило силу мышц и уменьшило признаки повреждения, но это доказательство концепции на мышах, а не лечение для людей.
Дистрофия Дюшенна это тяжёлое наследственное заболевание мышц, при котором из-за мутации в гене дистрофина в мышцах не хватает белка дистрофина, поддерживающего мышечные волокна при сокращении. Без него волокна разрушаются, замещаются рубцовой и жировой тканью, мышцы постепенно слабеют. Утрофин это родственный белок, который при избытке может частично заменить дистрофин. Проблема в том, как заставить организм вырабатывать достаточно утрофина, и новая работа проверяет редактирование гена утрофина, а не редактирование самого гена дистрофина.
Новорождённым мышам mdx на 7 день после рождения ввели внутрибрюшинно MyoAAV2A SpCas9 плюс sgRNA, общая доза 1 × 1012 vg на мышь, около 1.5 × 1014 vg/kg, контрольные мыши mdx получили PBS. Мышцу extensor digitorum longus проверили ex vivo в 5 недель.
Удельная тетаническая сила выросла примерно на 28.4 процента в группе Delta IMTR и примерно на 26.6 процента в группе Delta IMTR+ по сравнению с контролем PBS, n равно 4 мыши в группе. Белок утрофин в икроножной мышце вырос примерно на 98 процентов и примерно на 62 процента. Центральноядерные волокна составили примерно 18 процентов и примерно 14 процентов против примерно 56 процентов в контроле PBS.
Эффективность делеции in vivo в икроножной мышце составила примерно 19 процентов и примерно 17 процентов. Точных делеций было только примерно 46 процентов отредактированных аллелей в группе Delta IMTR и примерно 38 процентов в группе Delta IMTR+, остальные содержали дополнительные изменения в некодирующей области 3 prime UTR.
Это доказательство концепции только на мышах, лечения для людей нет, и безопасность доказанной не называется: отдельного исследования off-target и токсичности в полном тексте не найдено, основная доставка in vivo была MyoAAV, а не липидные наночастицы, которые использовались только в предварительном клеточном опыте с низкой эффективностью. Практический смысл пока в том, что подход, не зависящий от конкретной мутации, заслуживает дальнейших доклинических проверок, а не в готовом лечении.